Evaluation of thermal stability of an antifungal protein from Bacillus subtilis isolated in Vietnam

Đánh giá tính bền nhiệt của protein có hoạt tính kháng nấm từ chủng Bacillus subtilis phân lập ở Việt Nam

Abstract

Antifungal proteins were isolated from the crude bacterial supernatant using ammonium sulfate salt precipitation followed by passage over DEAE -cellulose and Biogel P100 columns. The purified protein had an apparent molecular mass of 14 kDa. Its antifungal activity was retained even at 100°C, for 60 min. The results of protein identification using MALDI -TOF/TOF mass spectrometer suggested that the purified protein is indeed a chitin binding protein that has 206 acid amine containing chitin -bind -3 region with a relative molecular mass of 22230 Da.

Protein có hoạt tính kháng nấm được tinh sạch từ dịch ngoại bào chủng vi khuẩn Bacillus subtilis sau khi qua ba bước tinh sạch: tủa muối ammonium sulphate 30-70%, qua cột sắc ký trao đổi ion DEAE – cellulose và cột săc ký lọc gel Biogel P100. Protein tinh sạch có khối lượng phân tử đạt 22 kDa trên điện di SDS-PAGE. Hoạt tính kháng nấm của protein tinh sạch vẫn còn duy trì khi ủ ở 100°C trong 60 phút. Kết quả nhận dạng bằng khối phổ MALDI -TOF/TOF đã chỉ ra rằng protein bền nhiệt này là chitin binding protein được mã hóa bởi 206 acid amin cùng với khối lượng phân tử là 22230 Da. trị an toàn đối với Al và Atrazie trong môi trường nước tự nhiên về khía cạnh bảo vệ sức khỏe sinh thái.